Atividade in vitro de plantas condimentares (Rosmarinus officinalis L., Lippia graveolens HBK e Thymus vulgaris L. ) contra o calicivírus felino / In vitro activity of plants used as condiments (Rosmarinus officinalis L., Lippia graveolens HBK e Thymus vulgaris L. ) against the feline calicivirus

O calicivírus felino (FCV) é um importante patógeno de gatos que causa lesões ulcerativas orais e infecções respiratórias. O vírus tem sido utilizado como modelo experimental para avaliação de agente antivirais contra norovírus (NoVs). Nesse estudo, investigou-se a ação dos óleos essenciais de alecrim (Rosmarinus officinalis L.), orégano mexicano (Lippia graveolens HBK.) e tomilho (Thymus vulgaris L.) frente ao FCV, in vitro. A toxicidade celular foi testada pelo método de MTT e os ensaios antivirais pelo teste de redução de placas. Três protocolos foram aplicados: a) diferentes concentrações não tóxicas dos óleos essenciais (CNTOE) foram incubadas com o vírus por 1 hora antes da inoculação (ensaio virucida); b) CNTOE foram adicionadas às células CRFK e incubadas por 1 hora antes da adsorção viral (ensaio de pré-tratamento); c) CNTOE foram adicionadas às células após a inoculação do FCV e mantidas por 18 horas (ensaio de pós-tratamento). A CC 50 para os óleos de alecrim, orégano mexicano e tomilho foram: 1300,21 ?g mL -1 ; 435,92 ?g mL -1 e 675,34 ?g mL -1 ; respectivamente. O óleo essencial de tomilho apresentou índice de seletividade [IS=CC 50 /CI 50 ] de 8,57 para o ensaio de pré-tratamento e 6,2 no ensaio virucida. O óleo de alecrim mostrou atividade antiviral no ensaio virucida (IS=6,54) e de pós-tratamento (IS=6,86). O orégano mexicano apresentou IS de 5,75 no ensaio virucida e 5,59 no de pós-tratamento. Conclui-se que os óleos essenciais de tomilho e alecrim apresentaram atividade frente ao FCV em diferentes momentos da infecção viral.(AU)

The feline calicivirus (FCV) is an important pathogen of feline causing oral ulcerative lesions and respiratory disease. This virus has been used as a model to evaluate antiviral compounds against Norovirus (NoVs). In this study, the essential oils of rosemary (Rosmarinus officinalis L.), mexican oregano (Lippia graveolens HBK) and thyme (Thymus vulgaris L.) were examined for their activity towards FCV, in vitro. The cytotoxicity was determined by the MTT test and the antiviral assays were performed by the plaque reduction test. Three protocols were applied: a) different non-toxic concentrations of the essential oils (NTCEO) were incubated with the virus for 1 hour before viral inoculation (virucidal assay); b) NTCEO were added to CRFK cells and incubated for 1 hour before viral adsorption (pre-treatment assay); c) NTCEO were added to cells after virus inoculation and maintained for 18 hours (post-treatment assay). The cytotoxic concentration at 50% (CC 50 ) for the essential oils of rosemary, mexican oregano, and thyme were: 1300.21 ?g mL -1 ; 435.92 ?g mL -1 and 675.34 ?g mL -1 ; respectively. The essential oil of thyme showed a selectivity index (IS=CC 50 /CI 50 ) of 8.57 at the cell pre-treatment assay and 6.2 at the virucidal assay. The essential oil of rosemary showed antiviral activity at the virucidal assay (IS=6.54) and, also, at the post- treatment assay (IS=6.86). The mexican oregano showed an IS of 5.75 at the virucidal assay and 5.59 at the post-treatment. Therefore, it can be concluded that the essential oils of thyme and rosemary show antiviral activity against FCV in different times of the infection.(AU)

Cytotoxicity of aqueous extracts of Rosmarinus officinalis L. (Labiatae) in plant test system / Citotoxicidade de extratos aquosos de Rosmarinus officinalis L. (Labiatae) em sistema-teste vegetal

This study investigated the cytotoxic activity of Rosmarinus officinalis L. (rosemary) aqueous extract on the cell cycle of Allium cepa. To this end, crude aqueous leaf extracts at four concentrations, 0.02, 0.04, 0.06 and 0.08 mg/mL, were tested on A. cepa meristematic root cells, at exposure times of 24 and 48h. Slides were prepared by the crushing technique, and cells analyzed throughout the cell cycle, totaling 5,000 for each control group and concentration. The four concentrations tested, including the lowest and considered ideal for use, at all exposure times, showed a significant antiproliferative effect on the cell cycle of this test system and presented a high number of cells in prophase. Our results evidenced the cytotoxicity of rosemary extracts, under the studied conditions.

Neste estudo investigou-se a ação citotóxica do extrato aquoso de Rosmarinus officinalis L. (alecrim) sobre o ciclo celular de Allium cepa. Para isso obteve-se extratos aquosos brutos de folhas secas desta planta em quatro concentrações, 0,02; 0,04; 0,06 e 0,08mg/mL, que foram testadas em células meristemáticas de raízes de A. cepa, nos tempos de exposição 24 e 48h. As lâminas foram feitas pela técnica de esmagamento, e analisaram-se células em todo ciclo celular, totalizando 5.000 para cada grupo controle e concentração. A partir dos resultados verificou-se que as quatro concentrações testadas, inclusive a menor e considerada ideal para consumo, em todos os tempos de exposição tiveram ação antiproliferativa significativa sobre o ciclo celular deste sistema teste, e apresentaram um grande número de células em prófase. Dessa forma, o alecrim, nas condições analisadas, mostrou-se citotóxico.

Avaliação toxicológica do óleo de alecrim (Rosmarinus officinalis) no sistema reprodutor e órgãos vitais de ratos Wistar Submetidos a Tratamento Subagudo / Evaluation of short-term exposure to rosemary oil (Rosmarinus officinalis) om male Wistar rats' reproductive system and vital organs

O alecrim (Rosmarinus officinalis L.-Labiatae) é uma planta a qual se atribuem diversos efeitos terapêuticos, sendo também conhecida por sua utilização na indústria de alimentos e cosméticos. A toxicidade do extrato aquoso do alecrim foi avaliada em fêmeas de rato onde mostrou ter efeito antiimplantação. Neste trabalho, verificou-se o efeito da administração do óleo de alecrim a ratos Wistar. Ratos adultos foram distribuídos em grupos controle (n=15), veículo (n=15)e tratado (n=15). Os animais do grupo tratado receberam, via intragástrica, 1 ml de óleo de alecrim (diluído em óleo mineral medical - Naturolâ)e os do controle 1 ml de água destilada, uma vez ao dia, por cinco dias consecutivos. Os animais foram pesados no primeiro dia de tratamento, a cada dois dias e no dia de sacrifício e o consumo de ração foi medido diariamente. Os animais foram sacrificadostrês dias após o término do tratamento, quando se procedeu a laparotomia para remoção e pesagem dos seguintes órgãos: testículos, epidídimo direito, vesículas seminais,próstata, rins, pulmões, fígado, cérebro e hipófise. Realizou-se a análise da concentração de espermatozóides a partir da secreção obtida da cauda do epidídimo esquerdo. Imediatamente após a administração do óleo de alecrim os ratos evidênciaram indícios de perda de equilíbrio, recuperando-se antes de 60 minutos. não foram observados outro indícios de toxicidade como redução de peso corporal, piloereção e mortes. O tratamento não interferiu com o consumo de ração. A concentração de espermatozóides foi: Controle=57x10 22x10(15); Veículo=54x10 17x10(14); Tratado=64x10 36x10(13), diferença significativa entre os grupos. Não houve perda significativa de peso de órgãos dos animais tratados. No dose utilizada , o óleo de alecrim não apresentou efeito tóxico para ratos Wistar, nem interferiu na produção de ganetas.

Evaluation of Short-term Exposure to Rosmarinus officinalis on Male Swiss Mice's Organs and Reproductive System

Rosemary (Rosmarinus officinalis L. - Labiatae) is a plant in the treatment of urinary disorders, dysmenorhea and respiratory problems. Rosemary toxicity was evaluated in famale rats and an anti-implantation effect was reported after treatment with an aqueous extract of this plant. This works analyzes the effect of a short-term administration of R. officinalis aqueous extract on vital organs, on the organs of the reproductive system and sperm concentration of mature male Swiss mice. Treated animals received 260 mg/kg of body weight for five days. Body and organs weights, sperm production and food consumption were evaluated. This preliminary investigation reports that no body weight reduction and no toxic effect on the organd, gamete production or food intake were detected in any of the groups analyzed, given the experimental protocol used.

Embryotoxicity and anti-implantation effects of Rosemary (Rosmarinus officinalis L.) extract in pregnant rats within preimplantation period

Previous study made with Rosmarinus officinalis Linné aqueous extract (rosemary) demonstrated that 130 mgkg-1 dose, commonly used as abortive by women, given to pregnant rats during preimplantation period may interfere with embryo implantation, but not disrupt the normal development of conceptus when this extract was given after implantation. The objetive of this study was to verify the mechanism by which a rosemary aqueous extract influences embryo implantation, by correlating its ingestion with possible alterations in embryo development. Pregnant wistar rats were randomly distribuited to 3 groups: one control (water) and 2 experimental groups. The rosemary extract was administered in 2 doses: 260 and 1040 mgkg-1, p.o., to females from GD1 (gestation day 1) to GD4, once daily. Then, each groups was subdivided and killed at 2 different moments: half of the animals at GD5 and the other at GD21, respectively for evaluation of the blastocysts before implantation, and for fetal evaluation. The treatment with 260 mgkg-1 caused a significant increase in the number of anomalous embryos collected in the uterus at GD5, presenting an embryotoxic effect. However, the embryos that managed to implant presented normal development when observed at term of pregnancy due to the absence of anomalies in the fetuses and no increase in the postimplantation loss rate. The administration of 1040 mgkg-1 of the extract did not present any embryotoxic effect. Nevertheless, at GD5, a decrease of 40 percent in the number of blastocysts present in the uterus was observed. This fact suggest that the treatment with the highest dose caused a longer embyo retention in the oviduct. Therefore, further studies are needed to determine the constituents of rosemary that are responsible for its embryotoxic effect and delayed embryo arrival at the uterus. Since rosemary is widely used in food preparations, it is important to realize more studies to determine the constituents that are responsible for the effects of rosemary aqueous extract.